高壓制備純化色譜系統(tǒng)的原理主要基于液相色譜法,并在高壓條件下進(jìn)行操作。其工作原理是利用混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離。具體來說:
固定相與流動(dòng)相:固定相通常是一種惰性的、多孔的固體或液體材料,固定在色譜柱內(nèi);流動(dòng)相則是含有被分析物質(zhì)的液體,在高壓泵的作用下通過色譜柱。
分配與洗脫:在分析過程中,流動(dòng)相中的組分在通過色譜柱時(shí),由于它們與固定相之間的親和力不同,因此它們?cè)诠潭ㄏ嘀械谋A魰r(shí)間也不同。與固定相親和力較小的組分將首先被洗脫出來,而與固定相親和力較大的組分則保留時(shí)間較長。
檢測與記錄:通過檢測器對(duì)洗脫出來的組分進(jìn)行檢測,可以得到它們的濃度隨時(shí)間的變化曲線,即色譜圖。這一過程中,泵系統(tǒng)提供高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相通過色譜柱,進(jìn)樣系統(tǒng)用于將樣品引入流動(dòng)相中,而數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)則用于記錄和處理檢測器產(chǎn)生的信號(hào),并生成色譜圖。
高壓制備純化色譜系統(tǒng)具有多種特點(diǎn),使其成為生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、有機(jī)合成產(chǎn)物等領(lǐng)域中不可少的實(shí)驗(yàn)室分離純化設(shè)備:
高效分離:由于操作在高壓條件下進(jìn)行,使得分析速度更快,分離效率更高。
多元梯度系統(tǒng):可以滿足不同樣品分離的需求,提高分離的靈活性和準(zhǔn)確性。
高準(zhǔn)確度與精密度:泵流量的高準(zhǔn)確度和精密度保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
自動(dòng)餾分收集:系統(tǒng)通常配備有自動(dòng)餾分收集器,可以方便地收集分離后的各個(gè)組分。
靈活性與可擴(kuò)展性:系統(tǒng)的設(shè)置靈活,使得分析方法由分析色譜向制備色譜擴(kuò)展更為容易。同時(shí),系統(tǒng)易于升級(jí),可以引入新的分離純化技術(shù)。
多種檢測器選擇:系統(tǒng)支持選配多種檢測器,如紫外-可見光檢測器、熒光檢測器等,以滿足不同樣品檢測的需求。